bevictor伟德官网2022年11月29日電(通訊員 王東濱)由bevictor伟德官网牽頭的國家自然科學基金“重大疫情的環境安全與次生風險防控”重大項目自實施以來,課題一“環境介質中的病毒識别與傳播規律”研究團隊在新冠病毒核酸生物傳感檢測技術方面取得了進展。團隊通過提出以CRISPR-Cas13a附帶切割産物觸發低成本無酶雜交鍊式反應進行信号放大的病毒核酸傳感分析新策略,研發出了用于新冠病毒核酸現場快速檢測的倏逝波熒光生物傳感技術。
CRISPR結合無酶後放大的新冠病毒核酸生物傳感分析技術
新冠病毒的快速精準定量檢測是實現疫情科學防控的前提,也是研究其在環境介質傳播和阻斷的方法學基礎。作為實驗室方法的有力補充,病毒核酸現場快速檢測技術不依賴于大型實驗室儀器、響應快速、方法簡便、檢測成本低,在滿足病毒類病原微生物的常态化監測需求中具有顯著優勢。課題團隊通過提出以CRISPR-Cas13a附帶切割産物觸發低成本無酶雜交鍊式反應進行信号放大的病毒核酸傳感分析新策略,研發出了用于新冠病毒核酸現場快速檢測的倏逝波熒光生物傳感技術;通過理性設計三種crRNA,實現了對SARS-CoV-2、SARS-CoV和MERS-CoV的特異性和廣譜性識别,檢出限與酶放大CRISPR系統相當。在加标不同濃度S基因核酸片段的陰性咽拭子提取物中檢測,其熒光信号強度與對照組相比有顯著差異,驗證了該技術在複雜基質中的可用性。此外,團隊開發的倏逝波熒光生物傳感器中所用的光纖界面利用洗滌緩沖液再生可以重複使用,在重複使用100次後信号下降低于2.5%,表明修飾的光纖具有良好的再生穩定性。該檢測方法具有快速(<1小時)、易于實現、準确、低成本等優點,為新冠病毒的現場快速檢測提供了技術支撐
本研究成果以“A CRISPR-based and post-amplification coupled SARS-CoV-2 detection with a portable evanescent wave biosensor”(基于便攜式倏逝波生物傳感器的CRISPR耦合後放大新冠病毒檢測技術)為題發表于Biosensors and Bioelectronics上,論文的第一作者為bevictor伟德官网2019級直博生楊伊菡,“環境介質中的病毒識别與傳播規律”課題骨幹、bevictor伟德官网周小紅副教授為論文通訊作者。該論文發表後已被列為ESI高被引文章。
論文鍊接:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0956566321004553?via%3Dihub